陈斯迪团队今日细胞发文全基因组筛选找到免疫疗法新靶点

▎学术经纬/报导

在曩昔几年里，免疫疗法彻底改变了癌症的医治格式。许多患者原先已不可救药，无药可治。但在免疫疗法面前，他们却能奇观般逃脱死神的魔爪，乃至能够数年无癌。

本研讨的通讯作者陈斯迪教授（图片来历：耶鲁大学）

但咱们也需求铭记，免疫疗法并非全能药。在一些患者里，它极为有用。但在剩余的患者中，它几乎没有效果。“免疫疗法对70%-80%的患者没有用果。”耶鲁大学的陈斯迪教授说道。为了了解背面的原因，他的团队决议对免疫疗法的主力军——T细胞进行一次“地毯式”的筛查，寻觅哪些基因能够调控它们的活性。这有望让免疫疗法谋福更多病患。

今天，这支团队在尖端学术期刊《细胞》上发布了他们获得的活跃研讨成果。

陈斯迪团队专心于运用根据CRISPR技能的办法，进行基因组的修改和高通量的挑选。从前，学术经纬也曾报导过他的团队怎么“千里挑一”，找到导致脑瘤的丧命基因突变。在这项研讨中，他们相同开发了一款新式的CRISPR挑选体系。

详细来看，研讨人员们首要从小鼠中别离出CD8阳性的免疫T细胞（它们是免疫疗法的主力），然后运用CRISPR技能对其进行全基因组水平上的修改。这些经过修改的T细胞在时间短的培育后，被输注回带有肿瘤的小鼠体内。可喜的是，一些小鼠的病况得到了缓解，标明输注进小鼠体内的免疫T细胞起到了抗击肿瘤的效果。

这款新式CRISPR挑选体系的示意图（图片来历：参考资料[1]）

随后，研讨人员们取出了小鼠的肿瘤，并对肿瘤环境中的T细胞进行了剖析，看看哪些基因在CRISPR技能的修改下呈现了改变。它们之中，或许就有抗击肿瘤的奥妙。剖析成果中，咱们发现了PD-1和Tim-3等已知的经典靶点，这也从旁边面支撑了这套挑选体系的牢靠程度。

Dhx37是本研讨中找到的一个新靶点（图片来历：参考资料[1]）

在已知的靶点外，本研讨也找到了一些新的靶点，其间一个叫做Dhx37的基因得到了研讨人员们的重视。这个基因编码的是一个RNA解旋酶，从前对它的了解并不算多。风趣的是，一旦T细胞内的这个基因被敲除，这些T细胞就会在体内展现出有力的抗肿瘤活性。考虑到研讨人员们运用的是“三阴性乳腺癌”的疾病模型，在通常情况下极为难治，这样的抗肿瘤活性显得难能可贵。

在T细胞中敲除Dhx37，能够起到抗肿瘤的效果（图片来历：参考资料[1]）

从这个成果上看，Dhx37编码的蛋白或许扮演了T细胞“刹车”的效果，按捺了它们的活性。后续的研讨也证明，其编码的蛋白确实会按捺T细胞的激活、细胞因子的发生、以及细胞毒性。“一旦咱们去掉这个免疫体系的‘刹车’，T细胞就会张狂地进犯肿瘤。” 陈斯迪教授在耶鲁大学的新闻稿中这样评论道。

后续的研讨中，研讨人员们经过转录组剖析和生化研讨，发现Dhx37在必定程度上经过NF-κB起效果，这也供给了一个潜在的机制模型。

本研讨的示意图（图片来历：参考资料[1]）

研讨最终，这支团队指出，这些成果标明晰其CRISPR体系在高通量挑选免疫疗法靶点上的有用性。PD-1与Tim-3在挑选成果中具有较高的评分，也标明晰这套挑选体系的牢靠。关于新挑选出的潜在靶点Dhx37蛋白，因为咱们尚没有针对它的小分子化合物，因而经过体外进行基因修改，削弱其活性，有望成为规划新式免疫疗法的一种思路。

在Dhx37之外，研讨团队们也正在探究其他挑选出的基因具有怎样的抗肿瘤潜力。针对这些靶点，新式的免疫疗法也正在开发之中。

参考资料：

[1] Matthew B. Dong et al., (2019), Systematic Immunotherapy Target Discovery Using Genome-Scale In Vivo CRISPR Screens in CD8 T Cells, Cell, DOI: https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.07.044

[2] Genome screen uncovers new targets for cancer immunotherapy, Retrieved August 22, 2019, from https://news.yale.edu/2019/08/22/genome-screen-uncovers-new-targets-cancer-immunotherapy